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酶试剂与仪器配套使用的方法

日期:2012-01-11浏览:1413次

一、检测前的准备:

1、开启仪器:
1)将电源适配器插入220v电源插座,将适配器DC插口插入仪器的电源接口接通仪器电源。
2)按“开关”键开启仪器。仪器显示自检界面。此时注意样品室内不能有样品放入,样品室门盖应盖住以保证样品室的光强正常并且无其他杂散光。
3)如果仪器自检不通过,仪器自动显示自检不通过信息;仪器自检通过后,自动进入选择检测项目界面。
[备注]:仪器进入选择检测项目界面后,建议用户将仪器预热10分钟,以确保光源稳定后再开始测量。
2、选定检测项目—“农药残留”
1)在待机检测状态下,仪器显示“检测项目”界面,按“▲”和“▼”键选定检测项目—“农药残留”;2)按“确认”键进入“农药残留”的待测界面。
3、设置检测编号:
1)将仪器光标移向“设置编号”。此时按下“确认”键,仪器显示编号设置界面。
2)按“▲”和“▼”键选定编号。
3)选定编号并确认编号无误后,按下“确认”键。
4、设定的显色时间:
1)将仪器光标移向“显色时间”。此时按下“确认”键,仪器显示显色时间界面。
2)按“▲”和“▼”键选定显色时间一分钟或三分钟,按下“确认”键,显色时间设置完成。

二、检测试剂(酶试剂)制备:

1、缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒出,溶于500ml 蒸馏水中,溶解、混匀即可。
2、底物;向标有“底物”的试剂瓶中加入2.7 ml 蒸馏水,溶解、混匀即可。0~5ºC环境下冷藏保存。
3、显色剂:按试剂瓶上的标签说明,向标有“显色剂”的试剂瓶中加入26 ml 缓冲液,溶解、混匀即可。
4、酶试剂:酶试剂已配成溶液可直接使用。平常要在0~5ºC环境条件下冷藏保存,切勿冷冻至结冰!!!
[备注]“酶试剂使用前请摇晃均匀。使用时用一瓶取一瓶,用完再取用新的,要防止其它物质的污染,以免溶液中毒失效,未用完的试剂可放在清洗干净的反应瓶中0~5ºC环境条件下保存。反应瓶建议用去污粉清洗,尽可能不用洗洁精清洗。(去污粉可在一般的日杂商站或医药化学试剂商店买到。)
5、试剂使用过程中防止污染应遵循的原则:
(1)器具专用原则:所有用于转移试剂或样品的器具都要专用并帖上标记,以免混用而造成交叉污染。
(2)试剂“只出不进”原则:每次测试时,从试剂瓶中吸出(抽取)的试剂不管是否使用,只要吸出来了,即便用不上或用不了造成浪费也不要打回去。否则,容易污染整瓶试剂造成更大损失,甚至影响以后所有的测试,产生错误的测试数据。

三、 样品前处理及对照样品、检测样品的制备:

1、 对照样品的制备:
取酶100ul,缓冲液2.5ml,加入专用反应瓶中,混匀,再加入显色剂100ul,底物20ul。摇匀后马上转移到比色皿中,放入仪器进行对照测试。
2、 检测样品的制备:
(1)取2g果蔬样品(叶菜剪成1厘米见方的小片,瓜果取1厘米见方的横截面)放入三角瓶中,加入10ml缓冲液, 振荡提取2分钟后过滤,取出清液即为待测试液。
(2)取酶100ul,待测试液2.5ml,加入专用反应瓶中,混匀静置抑制10分钟后,(按仪器显示的时间计时)加入显色剂 100ul,底物 20ul 。摇匀后马上转移到比色皿中

四、空白对照测量:

*步:按下“100%”键;
第二步:打开仪器门盖,将装有对照液的比色皿放入指定的通道中,盖好仪器门盖,按下“对照”键,屏幕左下角显示测量时间;
第三步:空白对照检测结束后,仪器自动显示空白样品对照测试结果Ao,打开仪器门盖,取出对照。
[备注]:
(1)当空白对照值在0.15-0.3之间时,可继续做实验;
(2)当空白对照值在<0.15时,要重新做空白对照,若连续做的空白对照值在<0.15时,必须更换酶试剂。
(3)当空白对照值在>0.3时,要调试减少仪器的测量时间,重新做空白对照。

五、 样品测量:

*步:按下“100%”键;
第二步:打开仪器门盖,将装有样品液的比色皿放入指定的通道中,盖好仪器门盖,按下“样品”键;
第三步:检测结束后,仪器自动显示指定通道农药残留检测样品的检测结果Ai,仪器自动保存对照值和检测结果,打开仪器门盖,取出样品。
[备注]:样品的抑制率在40~50%之间为可疑农残超标样品,抑制率大于50%为农残超标样品,表明被测样品的农药残留毒性可能超过安全的界定标准,建议用气相色谱等仪器分析法作进一步的确认。

六、检测结果打印:

在显示农药残留检测结果界面,按 “打印”键,仪器开始打印。

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